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5HT Elisa Kit 
5HT Elisa Kit
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英文名称 : Human 5-Hydroxytryptamine, 5HT Elisa Kit
货号 : EY-00H559
规格 : 96T/48T
品牌 : 上海一研
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5HT Elisa Kit原理:

ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。

5HT Elisa Kit组成:

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml×1 瓶

7

终止液

6ml×1 瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

阳性对照

0.5ml×1 瓶

3

酶标包被板

12 孔×8 条

9

阴性对照

0.5ml×1 瓶

4

样品稀释液

6ml×1 瓶

10

说明书

1 份

5

显色剂 A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 张

6

显色剂 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 个

自备材料

1)蒸馏水。

2)加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3)振荡器及磁力搅拌器等。

5HT Elisa Kit标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.操作步骤

1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1

孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7.温育:操作同 3。

8.洗涤:操作同 5。

9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.

10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

5HT Elisa Kit数据计算

1. 绘制标准曲线:各标准品 OD 值减去底色即减去空白孔 OD 值,以 6 个标准

品的 OD 值为纵坐标 y,以标准品的浓度为横坐标 x,绘制曲线图,如图示,

并计算出回归方程 y=ax+b。

2. 将待测样品的 OD 值代入方程式,计算各组样品浓度,再乘以稀释倍数,即

为样品的实际 ABP 浓度。

3. 敏感度:1.0 pg/ml

图片1.png

注意事项:

1. 实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。

2. 加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与最后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响

实验的准确性以及重复性。

3. 孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。

4. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。

5. 建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。

6. 建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商联系,

如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。

5HT Elisa Kit安全性

1. 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:2-8℃

2.有效期:6个月


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正品保障

确保所有产品都是原装正品

优质服务

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安全包装

统一包装,保障产品安全运输

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