NAD激酶（NADK）生化试剂盒（可见分光光度法）操作步骤

NAD激酶（NADK）生化试剂盒（可见分光光度法）操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

乳酸片球菌

戊糖片球菌

朝鲜芽孢八叠球菌

宋氏志贺氏菌

木醋杆菌

明亮发光杆菌

空肠弯曲杆菌

嗜酸乳杆菌

干酪乳杆菌

  耐盐芽孢杆菌

无乳链球菌

德氏乳杆菌乳酸亚种（莱氏曼氏乳杆菌）

斯氏李斯特氏菌

侧孢短芽孢杆菌

乳酸乳球菌乳亚种

牙龈卟啉单胞菌

菩提奇异球菌

干燥棒杆菌

屎肠球菌(屎链球菌)

具核梭杆菌多形亚种

脆弱拟杆菌

齿双歧杆菌

粘性放线菌

植物乳杆菌植物亚种

迟缓爱德华氏菌

哈氏弧菌