人ELISA试剂盒的实验操作步骤

　　实验想要顺利进行，我们必须按步骤来进行，尤其是相关细节操作要重视。为了更好的进行人ELISA试剂盒的应用，下面为大家详细介绍一下人ELISA试剂盒的实验操作步骤。

　　一、标准品的稀释：在小试管中进行稀释。

　　二、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样，待测样品孔中先加样品稀释液，然后再加待测样品。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　　三、温育：用封板膜封板后置室温温育半个小时左右。

　　四、配液：将浓缩洗涤液用蒸镭水稀释后备用

　　五、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置后弃去，如此重复几次，拍干。

　　六、加酶：每孔加入酶标试剂，空白孔除外。

　　七、再按照上述步骤进行一次温育和洗涤。

　　八、显色：每孔先加入显色剂，轻轻震荡混匀，室温避光显色十五分钟。

　　九、终止：每孔加终止液，终止反应。

　　十、测定：以空白空调零，依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。