细胞消化同样的时间对细胞是公平的

　　　　对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。

在消化的过程中，加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是公平的。

具体操作：

1） 首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗 1-2 遍，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。

2） 然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。

3）吸干净瓶内剩余液体，加入 0.3 ml 左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入 1 ml 左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打 2-3 遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用 2 ml 左右新培养基洗一遍与前面的混合。也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。

4）把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。也可以用新的胰酶。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养。

5）对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，必须分多批多次消化，这样才能大限度地将胰酶对细胞的损伤降到低，保证细胞的状态能够优。